A.I. Polinova, D.R. Zagirova, L.Yu. Kokaeva, I.I. Busko, I.V. Levantsevich, S.N. Elansky
Viimastel aastatel on kartuli ja seemnevarude fütosanitaarne seisund Valgevenes märgatavalt halvenenud. Teatud tüüpi kahjulike organismide roll ja nende suhe agrofütotsenoosides on muutunud. Paljude mitte ainult laialt levinud haiguste (hiline puhang, alternaria, igat liiki kärntõbi, bakterioos, kuiv fusarium-mädanik) kahjulikkus on suurenenud, vaid ka uute, ebapiisavalt uuritud, näiteks haava vesimädanik (joonis 1). Seda Indias, Kesk-Aasias ja teistes lõunapoolsetes riikides esinevat haigust täheldati Valgevene Gomeli, Bresti, Grodno ja Minski piirkonnas. Nagu teisedki mullas elavad oomütseedid, põhjustab P. ultimum massilisi kahjustusi liigniiskuse tingimustes - halvasti kuivendatud aladel, pikaajaliste vihmade ajal (Taylor et al., 2008).
Valgevenes täheldati haiguse levikut kasvuperioodi kõrgendatud temperatuuriga aastatel: mõnes kartulipartiis oli see 8–10% mugulatest. Mugulate vesine vesimädanik võib põhjustada olulist kahju, mille põhjustavad resistentsete sortide puudumine, välja töötatud kaitsemeetmed ja haiguse kiire areng mugulate kahjustumise korral (Zhuromskaya, 2003; Ivanyuk et al., 2005). Haigus mõjutab ainult mugulaid. Venemaal pole haava vesine mädanik veel märkimisväärne.
Selles töös uurisime Valgevene Riikliku Teaduste Akadeemia kartuli- ja aianduse (Minski oblast) teadus- ja praktikakeskuse (Minski oblast) teadus- ja praktikakeskuse hoidlates haavade vesimädaniku tekitajate 4 tüve, mis on eraldatud Vektar Valgevene, Skarbi ja selektsioonhübriidide kahjustatud kartulimugulatest. Uuringu eesmärk oli välja selgitada isoleeritud isolaatide liigid, nende virulentsus kartulimugulatega, hinnata kasvu erinevatel ümbritsevatel temperatuuridel ja vastupidavust metalaksüülile.
Isolaatide seeneniidistik kasvatati vedelal hernesöötmel (180 g külmutatud rohelisi herneid keedeti 10 minutit 1 liitris destilleeritud vees, misjärel neid autoklaaviti 30 minutit 1 atm juures); Igast tüvest eraldati DNA. DNA eraldamiseks tritureeriti külmutatud seeneniidistik vedelas lämmastikus, lüüsiti CTAB puhvris ja seejärel proteiiniti kloroformiga. DNA hoiti deioniseeritud vees temperatuuril –20 ° C. Liigispetsiifiliste genoomipiirkondade (tuuma ribosomaalsete geenide 18S ja 5,8S piirkonnad ning sisemine transkribeeritud intergeenne speisser ITS1) nukleotiidijärjestuste analüüs, mida amplifitseeriti praimeritega ITS1 ja ITS2 (White, 1990), näitas, et uuritud tüved kuuluvad Pythium ultimum Trow liikidesse. (sünonüüm Globisporangium ultimum (Trow) Uzuhashi, Tojo ja Kakish).
Kõik uuritud tüved mõjutasid niisketesse kambritesse paigutatud Gala kartulimugulate viilu. Neil tekkisid tumedad laigud, mis hiljem muutusid niisketeks, sügavale tungivateks haavanditeks (joonis 2). Infektsioon viidi läbi, asetades P. ultimum seeneniidistiku mugulaviilu keskele.
Inokuleeritud mugulakettaid inkubeeriti + 22 ° C juures. Mõjutatud piirkonna maksimaalne kasvukiirus märgiti esimesel kahel päeval, seejärel jäi haavandi pindala praktiliselt muutumatuks.
See muster kehtis kõigi uuritud tüvede kohta.
Tüvede kasvukiirust hinnati kaera agarsöötmel temperatuuridel 5, 15, 24 ja 34 ° C (joonis 3). Kasvu täheldati kõigil temperatuuridel; maksimaalset kasvukiirust täheldati temperatuuril 24 ° C (86 mm tass oli 2 päevaga täielikult kasvanud). 15 ja 34 ° C juures oli kasvukiirus märkimisväärselt madalam (tass kasvas üle vastavalt 4 ja 3 päevaga).
Temperatuuridel 15, 24 ja 34 ° C ei erinenud kõigi uuritud tüvede kasvukiirused. Temperatuuril 5 ° C kasvas tüvi P1 teistest palju kiiremini (20. päeval 4 mm), P4 - mõnevõrra aeglasemalt (10. päeval 4 mm), P2 ja P3 praktiliselt ei kasvanud.
Samuti tuleb märkida, et temperatuuril 24 ° C algas kasv kohe pärast nõusse istutamist, temperatuuridel 15 ja 34 ° C viivitas aktiivse kasvu algus 1 päeva ja 5 ° C juures 2 päeva.
Metalaksüül (ja selle isomeer mefenoksaam) on tunnistatud kõige tõhusamateks ravimiteks mulla oomütseetide tõrjeks. Metalaxil suudab tungida mugulatesse ja pakkuda (isegi väga madalatel kontsentratsioonidel) nende pikaajalist kaitset (Taylor et al., 2008, Bruin et al., 1982). Pärast lakkavate resistentsete tüvede ilmnemist populatsioonides väheneb metalaksüüli efektiivsus järsult. Ameerika Ühendriikide mitmest piirkonnast on leitud väga vastupidavaid tüvesid (Taylor et al., 2002). Valgevene P. ultimum tüvede resistentsuse kohta metalaksüüli kohta andmed puuduvad ja seetõttu otsustati selles töös testida nende resistentsust ravimile.
Fungitsiidmetalaksüüli suhtes tundlikkuse uuring viidi läbi kaeraagari söötmel, lisades erinevatele kontsentratsioonidele fungitsiidi (Pobedinskaya, Elansky, 2014).
Uuritud tüvedel oli mõningaid erinevusi resistentsuses metalaksüüli suhtes (tabel 1). Seega peatus fungitsiidide kontsentratsioonil 1 mg / l P4 tüve kasv täielikult ja ülejäänud tüved pidurdusid oluliselt. Tüved P1 ja P2 kasvasid väga aeglaselt söötmel, kus metalaksüüli kontsentratsioon oli 10 mg / l. Arvutatud efektiivne kontsentratsioon EC50 (fungitsiidi kontsentratsioon, mis aeglustas tüve kasvukiirust 2 korda võrreldes kontrolliga) oli kõigi tüvede puhul väiksem kui 1 mg / l. Seega olid kõik uuritud tüved metalaksüülile vastuvõtlikud; see on osutunud väga tõhusaks P. ultimum kasvu kasvu pärssimiseks.
Bruin jt. (1982) pärast taimede töötlemist vegetatsiooni ajal metalaksüüliga annuses 0,5 kg / ha oli fungitsiidi kogunemine mugulatesse 0,055 μg / g peridermis, 0,022 μg / g kortikaalses kihis ja 0,034 μg / g mugula keskosas. Meie andmetel on see metalaksüüli kontsentratsioon haiguse vastu võitlemiseks ebapiisav, kuid võib selle arengut aeglustada.
Kaera söötmel kasvades moodustasid kõik tüved monokultuuris oosporid (joonis 4), mis on tüüpiline P. ultimumile. Tüvede paariline splaissing ei näidanud vegetatiivse kokkusobimatuse nähtavaid sümptomeid - tassid olid mütseeliga ühtlaselt kaetud.
Saadud andmed näitavad, et P. ultimum on fütopatogeen, mis on võimeline kiiresti kasvama laias temperatuurivahemikus, sealhulgas säilitustemperatuuril 5 ° C. See on virulentne kartulimugulate kudede suhtes ja moodustab pikaajaliseks ellujäämiseks võimelised oosporid. Seega on liik ohtlik fütopatogeen, mis võib ohustada põllumajandust ja vajab täiendavaid uuringuid.
Uuring viidi läbi Vene Teadusfondi toetusel (projekt N 14-50-00029).
Tabel 1. P. ultimum -tüvede tundlikkus metalaksüüli suhtes
Tüve | Metalaksüüli kontsentratsioon, mg / l | ||
0 (kontroll) | 1 | 10 | |
P1 | 63 | 6 | 0 |
P2 | 65 | 5 | 0 |
P3 | 59 | 0 | 0 |
P4 | 61 | 0 | 0 |
P1 | 105 | 10 | 3 |
P2 | 110 | 10 | 3 |
P3 | 95 | 0 | 0 |
P4 | 98 | 0 | 0 |
Umbes Esitatakse 3 mõõtmise keskmised andmed.
Artikkel ilmus ajakirjas "Potato Protection" (nr 1, 2017)